产品简介

PicoQuant 单光子计数共聚焦显微镜Luminosa是一款将超高数据质量与超简日常操作相结合的单光子计数共聚焦显微镜。 它可以轻松集成到任何研究人员的“工具箱"中，成为开始探索使用时间分辨荧光方法科学家以及想要突破极限专家的省时、可靠的“伙伴"。 它是一个真正的显微镜系统，每个人都可以依赖。

细胞膜动力学和结构的映射

细胞膜是高度复杂和动态的结构。 它们的脂质和膜蛋白的分子组成经过精确调整，从而可以获得其生理功能所必需的物理和化学特性。 可以结合互补的荧光方法从不同的角度对生物膜进行研究：

对带有荧光标记的脂质或膜蛋白进行FCS，可以得到其扩散速度和蛋白质迁移率。它还可以表征在研究分子的浓度，而这些浓度可能因地点而异。

通过各向异性实验，可以获得分子取向及其变化。因此，各向异性成像可以可视化有序和无序的膜相，或监测分子的旋转运动。

荧光相关光谱 (FCS)

荧光相关光谱 (FCS) 是一种利用荧光强度随时间波动进行相关性分析的荧光光谱技术。 它为引起这些特征波动的光物理学以及检测到粒子的扩散行为和绝对浓度提供了价值的参考信息。 FCS 能够测定重要的生化参数，例如颗粒（分子）的浓度、大小或形状或其环境的粘度。

荧光寿命相关光谱 (FLCS)

荧光寿命相关光谱 (FLCS) 是一种利用皮秒时间分辨荧光检测来分离不同 FCS 贡献的方法。
在荧光互相关光谱 (FCCS) 中使用寿命不同、光谱不可分离荧光团时，FLCS 具有特别的优势，因为它可以消除光谱串扰和背景噪声。 它还提供了一种解决探测器后脉冲伪影的方法。

荧光互相关光谱 (FCCS)

荧光互相关光谱 (FCCS) 是根据不同的发射光谱区分来自两种不同物种 FCS 信号的方法。

使用 PAINT 和 dSTORM 为超分辨率 FLIM 修改的自定义模式

Luminosa 为方法开发提供了一种定制模式，其中每个光机组件都可以通过软件访问，并且可以自由选择参数。

利用这种模式超越了标准的 FLIM，展示了超分辨 FLIM。一方面，与弗里堡大学的 Guillermo P. Acuna 研究小组合作进行了 FLIM-PAINT 成像，另一方面，与哥廷根大学的 Jörg Enderlein 小组合作进行了 FLIM-dSTORM 成像。

单分子定位显微镜（SMLM）通过依次定位单个分子并随后合成超分辨图像，可提供空间分辨率超过衍射极限的图像。分子在亮态和暗态之间切换的机制各不相同，因此每帧图像只能定位一小部分分子。其中一种是纳米尺度地形图成像的 DNA 点积累（DNA-PAINT），它使用荧光标记的短寡核苷酸与互补的、目标结合的 DNA 分子瞬时结合。另一种方法是直接随机光学重构显微镜（dSTORM），在这种方法中，荧光团会闪烁，即随机开启、发射，然后迅速恢复到暗态。

在共聚焦成像中，扫描区域、像素数量和像素停留时间共同决定了每幅图像的采集时间。对于 PAINT，这需要与 DNA-PAINT 成像链的结合动力学相匹配，从而使采集时间大大小于平均结合时间。对于 dSTORM，则应根据荧光团的闪烁动力学来调整采集时间。

按照 SMLM 测量的通常做法，对由此产生的共焦 FLIM 图像系列进行分析，以获得最终的超分辨图像。最后，对每个单分子事件的光子到达时间进行检索和分析，以获得寿命对比度。

FLIM-SMLM 的优势:

• PAINT 或 dSTORM 带来的空间超分辨率

• 聚焦切片能力

• FLIM 带来的附加寿命对比，用于多路复用或 FRET

• 使用单激发激光的传统商用显微镜

• 可提供用于长时间测量的保持聚焦选项